EASYspin 酵母RNA快速提取試劑盒 酵母RNA快速提取試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點
產(chǎn)品介紹:
酵母細(xì)胞經(jīng)lyticase處理去除細(xì)胞壁后,獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶,然后用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,RNA選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜, 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,蛋白等雜質(zhì)去除, {zh1}低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點:
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界zm公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
3.快速,簡捷,單個樣品操作一般可在20分鐘內(nèi)完成。
4.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9~2.0,基本無DNA殘留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各種實驗。
注意事項
1.{dy}次使用前請先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后請及時打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入!
2.所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000 rpm的傳統(tǒng)臺式離心機(jī),如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
3.需要自備乙醇,β-巰基乙醇,水浴鍋。
4.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5.關(guān)于DNA 的微量殘留:
一般情況下,一般說來任何總RNA提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA的微量殘留,本公司的EASYspin系列RNA提取產(chǎn)品,由于采取了本公司獨特的緩沖體系和選擇了特殊吸附能力的吸附膜,在大多數(shù)RT-PCR 擴(kuò)增過程中極其微量的DNA殘留(一般電泳EB染色紫外燈下觀察不可見)影響不是很大, 如果要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA表達(dá)量分析如熒光定量PCR,我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時:
1)選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過mRNA中的連接區(qū),這樣DNA就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2)選擇基因組DNA和cDNA上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對。
3)將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔(cleanup),請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。
4)在步驟去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上進(jìn)行DNase I處理。請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。